?Tris-HCl緩沖液的配制方法
更新時間:2023-02-06 點擊次數(shù):1760次Tris-HCl緩沖液的配制方法
Tris-Hcl中文全稱三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽,別稱Tris鹽酸鹽,英文名TRIS hydrochloride。相信許多人對Tris都不陌生,Tris的應用非常廣泛,Tris緩沖液不僅被用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。
Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與構成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH。此外,Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標準物。 作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,盡量換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。
而Tris-HCl是由Tris作為主要原料反應得來的,其溶液呈酸性,主要用作生物緩沖液,來調(diào)整病毒保存液的pH值。如果需要調(diào)整至中性或者堿性,可以添加Tris或者NaOH來實現(xiàn)。除開這些信息外,Tris-Hcl的配置方法有哪些?你知道多少?下文將介紹Tris-Hcl的配置方法。
Tris-HCl緩沖液的配制方法:
1、Tris-Hcl(0.05mol/L,25℃)
使50ml 0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液與x ml 0.1mol/L 鹽酸混勻后,加水稀釋至100ml
PH x/ml PH x/ml
7.1 45.7 8.1 26.2
7.2 44.7 8.2 22.9
7.3 43.4 8.3 19.9
7.4 42.0 8.4 17.2
7.5 40.3 8.5 14.7
7.6 38.5 8.6 12.4
7.7 36.6 8.7 10.3
7.8 34.5 8.8 8.5
7.9 32.0 8.9 7.0
Tris分子量=121.14:0.1mol/L溶液為12.114g/L。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳,使用時應將瓶蓋蓋嚴。配置不同濃度和不同PH值Tris-Hcl溶液時,可以先配成一定PH值的0.05mol/L溶液,再稀釋到所需濃度。
2、1M Tris-Hcl(PH7.4、PH7.6、PH8.0)
組份濃度1M Tris-Hcl
配置量 1L
配置方法:
一、稱量121.1g Tris置于1 L燒杯中;
二、加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解;
三、按下面數(shù)值加入濃HCL量調(diào)節(jié)所需要的PH值;
PH值 濃HCL
7.4 約70ml
7.6 約60ml
8.0 約42ml
四、將溶液定容至1L;
五、高溫高壓滅菌后,室溫保存。
Tris-HCl緩沖液的配制方法