羊抗人IgG-HRP的詳細(xì)應(yīng)用范圍
更新時(shí)間:2023-08-22 點(diǎn)擊次數(shù):216次羊抗人IgG-HRP的詳細(xì)應(yīng)用范圍
產(chǎn)品名稱(chēng):羊抗人IgG-HRP
英文名稱(chēng):Goat Anti-Human IgG/HRP
規(guī)格:0.1ml
宿主:Goat
交叉反應(yīng):Human IgG
偶聯(lián)五:HRP
儲(chǔ)存條件: -20°C
辣根過(guò)氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),是臨床檢驗(yàn)試劑中的常用酶。該產(chǎn)品不但廣泛用于多個(gè)生化檢測(cè)項(xiàng)目,也廣泛運(yùn)用于免疫類(lèi)(ELISA)試劑盒。過(guò)氧化物酶作為多個(gè)試劑盒顯色體系的關(guān)鍵成分,對(duì)試劑盒的質(zhì)量有重要影響。
辣根過(guò)氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP) 比活性高,穩(wěn)定,分子量小,純酶容易制備,所以常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無(wú)色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個(gè)同工酶組成,分子量為40,000,等電點(diǎn)為pH3~9,酶催化的最適pH因供氫體不同而稍有差異,但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下飽和度硫酸銨溶液。
工作效價(jià):
直接ELISA法:1:500~1:1000,用TMB作底物(OD450nm)P/N=2.5~3.0為陽(yáng)性。
免疫印跡法:1:200~400,免疫組化:1:20~40,斑點(diǎn)免疫1:200~400。
應(yīng)用范圍:
抗原決定族的抗原性分析鑒定,各種抗原、抗體的定量、定性及定位分析測(cè)定等。
工作中易產(chǎn)生的問(wèn)題:
1.包被抗體或抗原不適,易產(chǎn)生陽(yáng)性值較小,或產(chǎn)生變異,即跳管現(xiàn)象。
2.用抗血清不純化,或純化程度太低的抗體包被,則陽(yáng)性值較小,或沒(méi)有陽(yáng)性梯度。
3.封閉不好或標(biāo)記物過(guò)濃可產(chǎn)生對(duì)照較高。
注意事項(xiàng):
1. 請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適工作效價(jià),部分實(shí)驗(yàn)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況可在工作效價(jià)基礎(chǔ)上進(jìn)行增加或減小。
2. 由于各實(shí)驗(yàn)室使用的抗體稀釋液不同,稀釋后酶標(biāo)抗體的保存效果有所不同,故不建議在沒(méi)有實(shí)驗(yàn)證明情況下,對(duì)抗體進(jìn)行稀釋后保存。
3.適當(dāng)選擇商業(yè)化的酶標(biāo)抗體稀釋保護(hù)液,有利于抗體稀釋后的穩(wěn)定保存。
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