β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)定試劑盒的組成
更新時(shí)間：2023-12-06 點(diǎn)擊次數(shù)：258次β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)定試劑盒的組成
（ 比色法 50 管/24 樣）
一、測(cè)定原理：
β-N- 乙 酰 氨 基 葡 萄 糖 苷 酶
（β-N-Acetylglucosaminidase，NAG）廣泛存在于各種組
織器官、體液、紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板中，是溶酶體
中的一種酸性水解酶。底物在 NAG 作用下水解，釋放
出游離的對(duì)硝基酚。加入堿性溶液停止反應(yīng)，并使對(duì)硝
基酚顯色。在 400nm 處測(cè)吸光度，可計(jì)算酶活力單位。
二、試劑組成及配制： (試劑 2-8℃保存，有效期 6 個(gè)月)
試劑一：溶液 40mL×1 瓶。
試劑二：底物，粉劑×1 支。
試劑三：終止劑 60mL×2 瓶。
試劑四：液體 6mL×1 瓶。(天冷會(huì)有結(jié)晶析出，測(cè)試前
置于 37℃水浴直至透亮)
試劑五：3mmol/L 對(duì)硝基酚標(biāo)準(zhǔn)貯備液 2mL×1 瓶。
0.6mmol/L 對(duì)硝基酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液的配制：將 3mmol/L 對(duì)
硝基酚標(biāo)準(zhǔn)貯備液用蒸餾水作 5 倍稀釋，即
3mmol/L 對(duì)硝基酚∶蒸餾水=1∶4 稀釋。
底物緩沖液的配制：底物溶解度小，配制底物溶液時(shí)，
應(yīng)先用適量試劑一將試劑二粉劑 1 支調(diào)成糊
狀，再邊攪拌邊逐漸加試劑一到 30mL，混勻
至溶解（不可加熱）。配好后的底物緩沖
液為過飽和溶液，如有結(jié)晶，可靜置或離心后
取上清進(jìn)行檢測(cè)。用不完的底物緩沖液 4℃可
保存兩個(gè)月以上。
三、操作步驟：
五、注意點(diǎn)：
1、用分光光度計(jì)測(cè)定時(shí)吸光度至 0.60 或酶活力至 60 單位
呈線性，超出此范圍應(yīng)將標(biāo)本用生理鹽水稀釋后重測(cè)，
結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
2、尿酶濃度隨尿流率而變動(dòng)，因此尿酶測(cè)定要求留取 24
小時(shí)尿；但因留 24 小時(shí)尿不方便，也不準(zhǔn)確，故用“酶
單位/肌酐"比值計(jì)算酶排出率，效果較好。
附錄Ⅰ: 大鼠腎皮質(zhì)中 NAG 的測(cè)定
1、 樣本前處理：
準(zhǔn)確稱取樣本的重量，按照重量(g):體積(mL)=1 : 9
的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻
漿，制成 10%勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清
再用生理鹽水稀釋成 1%的勻漿液待測(cè)。（該勻漿濃度僅
為參考用，客戶測(cè)定時(shí)可以根據(jù)這一濃度自行摸索樣本的
實(shí)際所需濃度）
2、 操作步驟：
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)定試劑盒的組成
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