明膠酶譜檢測(cè)試劑盒
更新時(shí)間:2024-01-02 點(diǎn)擊次數(shù):241次明膠酶譜檢測(cè)試劑盒
簡(jiǎn)介:
基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以無活性的酶原形式分泌,活化后能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白,又稱膠原酶。通過影響細(xì)胞外基質(zhì),膠原酶參與胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、組織重塑等過程,并參與炎癥、腫瘤、心血管、神經(jīng)等許多疾病過程。血漿與組織中的MMP-2、MMP-9參與各種生理與病理過程,其在診斷和治療中的意義日益受到重視。
明膠酶譜法是一種新型的蛋白質(zhì)分析方法,它可以提供準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)質(zhì)量分析和分子量分析結(jié)果。明膠酶譜法可以快速有效地測(cè)定蛋白質(zhì)中的氨基酸和糖基化激酶的活性。這種方法通
過使用蛋白質(zhì),核酸和其他復(fù)合物構(gòu)成的聚合物,結(jié)合相關(guān)的酶誘發(fā)反應(yīng),來分析蛋白質(zhì)的質(zhì)量和分子量。這些復(fù)合物可以在單獨(dú)的氨基酸片段中用來測(cè)量激酶反應(yīng),從而識(shí)別活性位點(diǎn),反映了蛋白質(zhì)質(zhì)量和分子量分析的結(jié)果。
明膠酶譜法的原理是基于膠質(zhì)酶結(jié)合物,它由多種蛋白質(zhì),核酸和其他復(fù)合物組成,使用酶
誘發(fā)反應(yīng)來分析蛋白質(zhì)的質(zhì)量和分子量。該方法由激酶和聚合物組成,它們分別催化了激酶和聚合物的反應(yīng),從而產(chǎn)生了激酶的活性。此外,該方法還能夠測(cè)量氨基酸片段的活性,這將有助于評(píng)估蛋白質(zhì)的質(zhì)量和分子量。
檢測(cè)目的:
本試劑盒用于檢測(cè)MMP-2、MMP-9 酶譜及活性(Detect MMP2 and MMP9 as low as 1nM)
檢測(cè)原理:
本試劑盒采用酶譜法(Zymography)檢測(cè)MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法,其靈敏度可達(dá)1 nM,高于ELISA方法,其基本原理1和程序是:制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE 凝膠,含蛋白酶的樣品在此凝膠中進(jìn)行電泳,電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer 孵育,凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶條帶的位置,蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮區(qū)域,從而能同時(shí)指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學(xué)反應(yīng)緩沖液,可檢測(cè)少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性,檢測(cè)靈敏度~1nM。試劑盒可進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)小膠檢測(cè),如果小膠加樣孔為10~15個(gè),則總計(jì)可檢測(cè)500~750個(gè)樣品。
試劑盒組成與儲(chǔ)存:
A. 2 x SDS-PAGE non-reducing buffer 1.5 ml, -20℃保存
B.10 x Substrate G, 50 ml,-20℃保存:
C.10 x Buffer A,50 ml,4℃保存,使用時(shí)用蒸餾水稀釋
D.10 x Buffer B,50 ml,4 ℃保存,使用時(shí)用蒸餾水稀釋:
E.SDS-PAGE 凝膠蛋白質(zhì)考馬斯亮藍(lán)染色液,50ml,4℃保存
注意事項(xiàng)
1.10 mM EDTA能夠抑制MMP活性
2.凝膠干燥:可使用聚丙烯-酰胺凝膠干膠裝置室溫快速干燥凝膠,作為記錄保留。
3.本試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不得用于食用、臨床醫(yī)療等其它用途。
4.實(shí)驗(yàn)操作中,請(qǐng)穿戴好實(shí)驗(yàn)服、防護(hù)口置和一次性實(shí)驗(yàn)手套,避免直接接觸,嚴(yán)禁入口。
使用該試劑盒發(fā)表的文章:
本產(chǎn)品僅供科研,不得用于臨床,醫(yī)療,食用等
明膠酶譜檢測(cè)試劑盒