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明膠酶譜法實驗中：凝膠蛋白質(zhì)考馬斯亮藍(lán)染色操作步驟以及說明
更新時間：2015-08-03 點擊次數(shù)：4544次信帆生物代理銷售基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/9酶譜法試劑盒，現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎。
常規(guī)考馬斯亮藍(lán)SDS-PAGE 凝膠蛋白質(zhì)染色是實驗室常用的凝膠染色方法。銀染方法雖然靈敏度
高，但所需試劑復(fù)雜并且有毒有害，操作步驟繁瑣，難以控制獲得好的染色效果。
染色步驟：
1. 此染色液即為工作液，使用時直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養(yǎng)皿中以考馬斯亮藍(lán)染色液覆蓋凝
膠，并緩慢搖動2h；
2. 傾去染色液，用脫色液沖洗凝膠；
3. 以脫色液覆蓋凝膠，緩慢搖動2h，傾去脫色液，再加入新脫色液進(jìn)行脫色，直至獲得清晰的
藍(lán)色的條帶和干凈的背景（通常此過程需要2～4h，也可脫色過夜至清晰的藍(lán)色的條帶和干凈
的背景）；
4. 對凝膠進(jìn)行分析和照相，凝膠可放置在7％的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置（P2000）對
凝膠進(jìn)行處理后保存。
安全性：含有甲醇，無特殊毒性，按一般化學(xué)品操作規(guī)程處理。
說明：
1. 染色液配方：0.25g 考馬斯亮藍(lán)R250+420ml 甲醇+100ml 冰乙酸，定容至1000ml，混合1h 后用
Whatman 1 號濾紙過濾，于室溫可無限期保存；
2. 脫色液配方：冰醋酸:甲醇:水＝7:5:88（V:V:V）；
3. 保存液：7％冰醋酸；
4. 凝膠染色之后，染色液可以回收利用，裝入新容器內(nèi)，室溫或4 oC 保存，可反復(fù)使用2-4 次。
