鈣離子檢測(cè)試劑盒,鈣離子試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
更新時(shí)間:2017-02-15 點(diǎn)擊次數(shù):1818次鈣離子檢測(cè)試劑盒,鈣離子試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
鈣離子檢測(cè)試劑盒說明書
一.檢測(cè)原理:樣本中鈣離子在堿性溶液中與甲基百里香酚藍(lán)(MTB)結(jié)合,生成藍(lán)色絡(luò)合物;
通過比色與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行比較,可計(jì)算出樣本中鈣的含量。
二.測(cè)定范圍:本試劑盒可以測(cè)定各類動(dòng)物血清(漿)、組織等樣本中鈣的含量。
三.自備儀器和用品:
酶標(biāo)儀(610nm)、微量移液器、漩渦混勻器
四.試劑組成:
96T 規(guī)格組分保存
試劑一10mlX1 瓶MTB 試劑4℃避光保存6 個(gè)月
試劑二20mlX1 瓶堿性溶液室溫保存6 個(gè)月
試劑三1mlX1 瓶蛋白澄清劑室溫保存6 個(gè)月
試劑四1mlX1 支2.5mmol/L 鈣標(biāo)準(zhǔn)液4℃避光保存6 個(gè)月
1mmol/L 鈣標(biāo)準(zhǔn)液的配制: 用去離子水將2.5mmol/L 鈣標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行2.5 倍稀釋(即2:3 稀釋)
工作液I 的配制: 試劑一:試劑二= 1:2 的比例進(jìn)行配制,現(xiàn)用現(xiàn)配(測(cè)血清、血漿樣本)
工作液II 的配制: 試劑一:試劑二:試劑三=10:20:1 的比例進(jìn)行配制,現(xiàn)配現(xiàn)用(測(cè)組織樣本)
五.樣本要求:
A.按常規(guī)檢驗(yàn)要求采集處理樣本,樣本可以是血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞培養(yǎng)上清。
B.樣本2-8℃可穩(wěn)定3-4 天,-20℃以下可穩(wěn)定數(shù)月。
六.測(cè)定步驟
A.血清(漿)操作步驟
空白孔標(biāo)準(zhǔn)孔測(cè)定孔
去離子水(ul) 10
1mmol/L 鈣標(biāo)準(zhǔn)液(ul) 10
血清(漿) 10
工作液I(ul) 250 250 250
混勻,靜置5 分鐘,波長610nm,酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的OD 值。
注:實(shí)驗(yàn)前可先將96 孔板用酶標(biāo)儀讀取并記錄空白OD 值,以保證實(shí)驗(yàn)的度。
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計(jì)算公式:
B.組織或細(xì)胞勻漿的操作步驟
(1)前處理:準(zhǔn)確稱取組織重量按重量(g):體積(ml)=1:9 的比例加入9 倍體積的去離
子水,冰水浴勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心10 分鐘,取10%的勻漿上清液待測(cè)。
(2)操作:見說明書
注:實(shí)驗(yàn)前可先將96 孔板用酶標(biāo)儀讀取并記錄空白OD 值,以保證實(shí)驗(yàn)的度。
計(jì)算公式:
注:*gprot/L 為克蛋白/升
七.注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)應(yīng)避免鈣污染,建議用一次性96 孔板操作。
2.嚴(yán)重溶血,黃疸或脂血對(duì)結(jié)果有影響。
3.制備組織勻漿時(shí),應(yīng)選用去離子水作為勻漿介質(zhì),避免鈣污染。
4.本試劑盒可上全自動(dòng)/半自動(dòng)生化分析儀
5.測(cè)定組織或細(xì)胞中鈣離子含量,同時(shí)測(cè)定總蛋白濃度。
6.本試劑盒僅用于科研。
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