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雞白細(xì)胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介!

更新時(shí)間:2017-11-24   點(diǎn)擊次數(shù):1112次

雞白細(xì)胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介!

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱。自上世紀(jì)70年代初問(wèn)世 以來(lái),發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用 于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。

檢測(cè)目的:

本試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素2(IL-2)含量。

雞白細(xì)胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介!

實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中雞白細(xì)胞介素2(IL-2)水平。用純化 的雞白細(xì)胞介素2(IL-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中 依次加入白細(xì)胞介素2(IL-2),再與 HRP 標(biāo)記的白細(xì)胞介素2(IL-2)抗 體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素2(IL-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo) 準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中雞白細(xì)胞介素2(IL-2)濃度。

操作步驟:

  • 標(biāo)準(zhǔn)提供標(biāo)準(zhǔn),戶可管中進(jìn)行稀 釋。

180ng/L

5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

90ng/L

4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

45ng/L

3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

22.5ng/L

2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

11.25ng/L

1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150µl  2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

  • 加樣設(shè)白對(duì)標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)標(biāo)被板標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn) 50µl,測(cè)樣 40µl, 然后測(cè) 10µl樣品zui 5 。加樣標(biāo),盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  • 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
  • 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
  • 溫育:操作同 3。
  • 洗滌:操作同 5
  • 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
  • 終止終止 50µl,終應(yīng)時(shí)藍(lán)轉(zhuǎn)黃。
  • 測(cè)定調(diào)450nm 波長(zhǎng)依測(cè)OD 。 測(cè)應(yīng)加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
  •  
  • 保存條件及有效期:
  • 12-8

    2.有效期:6 個(gè)月

  • 雞白細(xì)胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介!

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