信帆生物提供：雌二醇放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)，雌激素放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)
更新時(shí)間：2018-07-03 點(diǎn)擊次數(shù)：1273次信帆生物提供：雌二醇放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)，雌激素放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)間為5-7個(gè)工作日，提供原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)室儀器型號(hào)，標(biāo)曲，操作步驟等，咨詢！
雌二醇放免試劑盒相關(guān)資料如下：
【成分】
1. 125I-E2：1瓶，紅色液體。放射性活度＜0.11MBq/瓶（100管）。
2. E2標(biāo)準(zhǔn)品：7瓶，淡黃色液體（去激素人血清配制）。濃度分別為：0；10；50；100；250；500；1000 pg/ml。
3. 兔抗-E2 抗體：1瓶，藍(lán)色液體（兔抗）。
4. 質(zhì)量血清：2瓶，淡黃色液體。參考值范圍：質(zhì)控血清Ⅰ 56.5±12.8 pg/ml
質(zhì)控血清Ⅱ 248.6±58.6pg/ml
5. 分離試劑：1瓶，懸浮液（含驢抗兔血清和PEG）。
【放射性核素半衰期】碘[125I]物理半衰期（T1/2）為59.7天。
【測(cè)定原理】
本藥盒采用競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫分析方法，將放射性標(biāo)記抗原和非標(biāo)記待測(cè)抗原同時(shí)與*特異抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)，通過分離未結(jié)合的標(biāo)記抗原，測(cè)定標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物的放射性計(jì)數(shù)，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線和RIA的數(shù)學(xué)模型計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。
【意義】
人體內(nèi)雌二醇是雌激素中生物活性zui強(qiáng)的雌激素。男性雌二醇由產(chǎn)生，女性則由卵巢分泌。循環(huán)血液中的雌二醇絕大部分與性激素結(jié)合球蛋白結(jié)合，在肝臟代謝，變成水溶性硫酸酯或葡萄糖醛酸酯，經(jīng)腎臟排出。男性E2水平升高主要是由或肝臟腫瘤所致。女性E2會(huì)促進(jìn)生殖上皮、乳腺、長(zhǎng)骨的生長(zhǎng)和第二性征的發(fā)育。測(cè)定E2對(duì)青春期前女性內(nèi)分泌疾病的診斷，對(duì)閉經(jīng)、月經(jīng)紊亂、卵巢功能評(píng)估有重要意義，是研究生殖生理和診斷不孕癥的重要手段。
【禁忌】受檢者在試驗(yàn)期間不得接受內(nèi)放射性核素檢查或治療。
【樣品采集】
取靜脈血分離血清，勿需加防腐劑及其它處理，溶血和脂血標(biāo)本影響測(cè)定結(jié)果。如不立即測(cè)量，可將血清樣品密封后，置于2-8℃或-20℃存儲(chǔ)。2-8℃保存不應(yīng)超過48小時(shí)；-20℃保存不超過2個(gè)月，應(yīng)避免反復(fù)凍融。
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【操作程序】
取園底聚苯乙烯試管若干，編號(hào)后按以下加樣順序表進(jìn)行加樣。加樣前所有試劑包括待測(cè)樣品要搖勻。為了加樣準(zhǔn)確各種試劑和樣品好平衡到室溫之后加樣。
加樣程序表 單位：μl
管別 試劑 | 總T管 | NSB管 | S0 管 | S1~6 管 | 樣品或質(zhì)控管 |
純化水 | — | 100 | — | — | — |
“0”標(biāo)準(zhǔn)品 | — | 100 | 100 | — | — |
S1~6標(biāo)準(zhǔn)品 | — | — | — | 100 | — |
樣品或質(zhì)控血清 | — | — | — | — | 100 |
125I-E2 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
兔抗-E2 抗體 | — | — | 100 | 100 | 100 |
充分混勻置37℃水浴1.5小時(shí)。 | |||||
分離試劑 | — | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分搖勻， 3600轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，吸棄上清液。用γ-測(cè)量?jī)x測(cè)定各管沉淀的放射性計(jì)數(shù)。 | |||||
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【數(shù)據(jù)處理】
1. 設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B，非特異管計(jì)數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計(jì)算公式為：
B/B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100%
以上各標(biāo)準(zhǔn)品B/B0%為縱軸，以相應(yīng)濃度為橫軸，在logit-log或半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制劑量反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線，待測(cè)樣品濃度可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。
2. 計(jì)算機(jī)處理：采用RIA數(shù)據(jù)處理軟件，選擇合適的數(shù)學(xué)模型計(jì)算結(jié)果。
【技術(shù)指標(biāo)】
- 非特異結(jié)合率（NSB）：＜5%
- 零管結(jié)合率：> 30%
- 靈敏度：＜5 pg/ml。
- 精密度：批內(nèi)變異系數(shù)＜10%，批間變異系數(shù)＜15%。
- 準(zhǔn)確度：回收率94-109%.
- 標(biāo)準(zhǔn)曲線：相關(guān)系數(shù)>0.990。
- 單位換算：（pmol/ml）=（pg/ml）×3.67
【注意事項(xiàng)】
- 所有試劑包括待測(cè)樣品事先應(yīng)在室溫平衡。使用時(shí)須充分搖勻。
- 分離試劑在2~8℃保存，不可冰凍。
- 離心速度可用3000轉(zhuǎn)/分，但至少30分鐘。離心時(shí)機(jī)內(nèi)溫度在4~25℃之間。
- 不同批號(hào)試劑不能混合使用，建議樣品做雙管檢驗(yàn)。
- 本實(shí)驗(yàn)使用放射性同位素，操作應(yīng)由經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)技術(shù)人員按放免檢驗(yàn)的規(guī)定進(jìn)行。產(chǎn)生的放射性廢物應(yīng)按國(guó)家有關(guān)規(guī)定處理。
【正常參考值】
男：青春期前：＜10 pg/ml 女：青春期前：＜8 pg/ml
成 人 ：＜70 pg/ml 卵泡期：10-90 pg/ml
排卵期：100-500 pg/ml
黃體期：50-240 pg/ml
絕經(jīng)期：＜60 pg/ml
各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室條件和接觸的人群建立自己的正常值范圍。以上數(shù)據(jù)僅供參考。
【貯藏】2~8℃遮光保存，常溫運(yùn)輸5天內(nèi)不影響藥盒質(zhì)量。
【有效期】一個(gè)月
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