抗酒石酸酸性磷酸酶的相關(guān)知識
更新時間：2019-05-10 點擊次數(shù)：1519次 抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase , TRACP) 為近發(fā)現(xiàn)的骨吸收和破骨細胞活性的良好標志物, 測定血清中TRACP 尤其是TRACP-5b 的濃度, 有助于了解生理條件和各種病理條件下的骨代謝狀況。
抗酒石酸酸性磷酸酶缺乏和過度表達的大鼠模型分別表現(xiàn)為骨硬化和骨質(zhì)疏松。骨吸收時, 破骨細胞附著在骨的表面, 分泌的酸和蛋白酶在骨基質(zhì)與破骨細胞之間形成一個空隙, 磷酸酐酶和H + - ATP 酶質(zhì)子泵形成一個酸性環(huán)境, 位于破骨細胞微粒體TRACP ,即通過破骨細胞波狀緣分泌進入此空隙, 與其他酶一起參與骨基質(zhì)中固體鈣磷礦化物的降解。
骨細胞TRACP 具有細胞特異性,分泌呈激素應(yīng)答模式并有復(fù)雜的調(diào)節(jié)機制。甲狀旁腺激素能刺激破骨細胞分泌TRACP; 降鈣素可有效抑制其分泌; 細胞外高濃度的鈣離子可負反饋調(diào)節(jié)TRACP 的分泌; TRACP 的有效非競爭性抑制劑鉬酸鹽可使TRACP 導(dǎo)致的骨吸收面積減小。在破骨細胞內(nèi), 環(huán)磷酸腺苷(cAMP) 、細胞內(nèi)鈣和鳥苷酸結(jié)合蛋白(G蛋白) 也參與TRACP 的調(diào)節(jié)。
抗酒石酸酸性磷酸酶的適PH 為4.9～6.0 , 等電點在8.5～9.0 ,對非特異性酸性磷酸酶和堿性磷酸酶所共用的多種磷酸酯底物顯示較低的專一性, 可以水解廣泛存在于自然界和合成的各種磷酸酯, 也能水解無機焦磷酸鹽。大多數(shù)TRACP 可被巰基化合物、亞鐵離子、酒石酸鹽等激活。
抗酒石酸酸性磷酸酶染色液主要用于細胞和組織的抗酒石酸酸性磷酸酶染色。主要由萘酚、六氮化對品紅、亞硝酸鈉等組成,染色后酶活性部位呈紅色。
實驗流程：
制備切片/細胞爬片→TRACP染色液孵育→蘇木素復(fù)染→封片、觀察拍照
