天青石藍(lán)B染色液的說明介紹
更新時(shí)間:2019-05-15 點(diǎn)擊次數(shù):1357次 蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE 染色,是病理學(xué)和組織學(xué)常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易
與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。
單純的明礬蘇木素細(xì)胞核染色后的缺點(diǎn)是對隨后的酸性染料比較敏感,Van Gieson 染色時(shí)使用的酸可脫掉大部分蘇木素的顏色,以致細(xì)胞核幾乎看不到,在這種情況下使用鐵蘇木素或天青石藍(lán)可抵抗酸的影響而達(dá)到滿意效果。
天青石藍(lán) B 染色液主要由 0.5%天青石藍(lán) B 組成,多與明礬蘇木素聯(lián)合使用,其優(yōu)勢在于天青石藍(lán) B 能抗酸,且高鐵鹽可加強(qiáng)明礬蘇木素與細(xì)胞核的結(jié)合力,使細(xì)胞核染色更深,因此可以達(dá)到抗酸的目的,使蘇木素的顏色不易褪去。
操作步驟(僅供參考):
1、 石蠟切片脫蠟,梯度乙醇水化至水。
2、 入天青石藍(lán) B 染色液浸染 2-5min。
3、 蒸餾水沖洗,按要求繼續(xù)進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1、 隨著染色液放置時(shí)間的延長,染色力會有所下降,染色時(shí)間也需延長。
2、 染液的使用程度越強(qiáng),染色力下降越快,染色時(shí)間也就越長。
3、 冰凍切片的染色時(shí)間應(yīng)縮短,在無緩沖液的福爾馬林溶液浸泡時(shí)間較長的組織及脫鈣組織染色時(shí)間應(yīng)延長。
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