胰島素（INS）放免試劑盒檢測準確性高嗎？
更新時間：2019-06-17 點擊次數(shù)：1684次胰島素（INS）放免試劑盒檢測準確性高嗎？
很多老師在檢測胰島素這個指標的時候，經常問我們這個指標使用什么方法檢測，如果用放免檢測，準確性高嗎。胰島素這個指標在檢測選擇方法的時候，ELISA和放免都是可以的，但是論檢測的準確性和靈敏度以及重復性，我們還是使用放免的方法，上也常常使用放免的方法來檢測胰島素含量。下面讓我們一起來了解一下胰島素放免試劑盒的組成和原理吧。
胰島素(INS)放免試劑盒
[藥品名稱] 通用名：典[ 125I]- 胰島素放射免疫分析藥盒盒
漢語拼音：Dian[ 125I] Yidaosu Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名:Iodine[ 125I]- Insulin Radioimmunoassay Kit
簡稱：典[ 125I] 胰島素（Ins）放免藥盒
[使用目的] 用于定量測定人血清或血漿中胰島素（Ins）的濃度。
[用途] 胰島素的測定主要用于對糖尿病的分型，即通過胰島素釋放實驗，區(qū)分糖尿病的類型。 另外對于研究胰島素β細胞的分泌功能、胰島素瘤的分析、探討冠心病機理等也有一定的意 義。
[試驗原理] 本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理：含胰島素（Ins）的樣 品和 125I 標記的胰島素（Ins）與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二抗及 PEG，使免疫復合物沉淀，離心，測沉淀放射性計數(shù)。通過標準曲線得到樣本中胰島素（Ins） 的濃度。
[試劑主要組成成分] 1、 胰島素標準品：6 瓶，凍干品 A-F，濃度分別為 7、20、40、90、180、350mIU/L，使用 時加 1.0ml 溫育液溶解。 2、質控血清：兩瓶，凍干品，使用時加 0.5ml 蒸餾水溶解。 濃度為： L： H： 3、抗 Insulin 血清： 一瓶，藍色溶液，2～8℃冷存。 4、125I-Insulin 標記物：凍干品 1 瓶，< 88.23 kBq/100T，50 管加 5.5ml，100 管加 11ml，200 管加 22ml 溫育液溶解。 5、分離劑： 一瓶，含二抗血清、PEG 等，充分搖勻后使用，2～8℃冷存。 6、溫育液：一瓶，2～8℃冷存。 [儀器] 1、 γ－計數(shù)器 2、低溫離心機 樣本收集和保存： 220 微升人血清樣本。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中，靜置使其凝固后，1500 轉／分離心，取其上清液，放置玻 璃瓶中。如果樣本不立即使用，可在-18℃~-25℃儲存 6 個月。 嚴重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結果有影響。
[使用前準備] 試驗前，恢復樣本至室溫，小心搖勻血清樣本。 [實驗方法] 1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫，凍干品按操作要求進行溶解,平衡至少 30 分鐘 以上才可進行操作； 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號，所有實驗均做雙管重復； 3、 每個 NSB 管加入 200µl 溫育液，每個標準品“0”管 加入 100µl 溫育液； 4、 取每個濃度的標準品（A~F）、質控血清和樣本 100µl 加入相應編號的試管中； 5、 每管均各加入 100µl 標記物工作液； 6、 每管均各加入 100µl 抗體工作液，充分混勻； 7、 37℃溫育 2 小時； 8、 每管均各加入 500µl 分離劑后，充分混勻； 9、 室溫放置 15 分鐘后，離心 3500 轉／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液； 10、 用 γ-計數(shù)器測定各管計數(shù) CPM. 檢測時間: 1 分鐘； 11、 從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
[實驗過程中應注意] 1、 γ-計數(shù)器本底計數(shù)應≤100CPM/分，效率應≥75％； 2、 加入放射性標記物時，應做好防護、小心謹慎，以避免造成放射性污染； 3、 如果某一個樣本的測定值高于高濃度的標準品濃度，用零標準品以 1：2 或 1： 4 的比例稀釋樣本后重新測試，測試結果乘以相應的稀釋倍數(shù)。
[質量控制] 每次實驗操作應至少采用兩個濃度的質控血清進行質量控制，以確保每次實驗測定結果 的可靠性。 100 100 1、 質控血清的平均值應在允許范圍內； 2、 曲線方程應采用佳擬合方式； 3、 重復樣本的測定結果相差在 15％以內。 如不能同時滿足以上條件，則此次試驗結果無效，全部試驗需重新進行。
[測定結果的計算] 1、 計算標準品（A~F）、質控品和樣品與標準品 0 的比值（B/B0）; 2、 劑量-反應曲線按“對數(shù)劑量-結合率對數(shù)”（Log(dose-Log(B/Bmax))數(shù)學模型 或四參數(shù)數(shù)學模型擬合，通過每個標準品的 B/B0和其濃度建立標準曲線； 3、 從標準曲線上查出樣本的濃度值，B/B0不在標準曲線之內的樣本及其濃度
胰島素（INS）放免試劑盒檢測準確性高嗎？
