信帆生物為您提供:直接膽紅素試劑盒的操作說明
更新時間:2019-08-01 點擊次數(shù):1250次信帆生物為您提供:直接膽紅素試劑盒的操作說明
信帆生物供應(yīng)直接膽紅素試劑盒,操作簡單方便,準(zhǔn)確性高,重復(fù)性好!
直接膽紅素檢測試劑盒說明書( Direct Bilirubin kit,DBIL 釩酸氧化法)
直接膽紅素(DBil)又稱結(jié)合膽紅素,是由間接膽紅素進(jìn)入肝后受肝內(nèi)葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的作用與葡萄糖醛酸結(jié)合生成的。
【應(yīng)用范圍】
本試劑盒用于血清(漿)中直接膽紅素(DBIL)的定量測定。血清(漿)中總膽紅素高常見于肝炎、肝外膽道阻塞、溶血性疾病、新生兒黃疸等。
【檢驗原理】
直接膽紅素在釩酸作用下被氧化,生成膽綠素,測定在450nm處吸光度的減少與直接膽紅素的濃度成正比。
【試劑組成:96T】
試劑 | 規(guī)格裝量 | 儲存條件 |
試劑1 | 20mL×1瓶 | 試劑2~8℃可穩(wěn)定一年 |
試劑2 | 5mL×1瓶 |
【樣本要求】
血清(漿),采血后應(yīng)及時分離,避免溶血、光照。樣本應(yīng)盡快測定。
【操作步驟:酶標(biāo)儀】
| 空白孔 | 測定孔 | |
蒸餾水(μL) | 7 |
| |
樣品(μL) |
| 7 | |
試劑一(μL) | 200 | 200 | |
輕輕震蕩,37℃反應(yīng)5分鐘后,酶標(biāo)儀波長450nm,讀取吸光度A1 | |||
試劑二(μL) | 50 | 50 | |
輕輕震蕩,37℃反應(yīng)5分鐘,酶標(biāo)儀波長450nm處,讀取吸光度A2 |
注:建議加試劑時用多道移液器(排槍)操作。△A= A1-A2
【計算公式】
直接膽紅素含量(μmol/L)=13803×(△A測定-△A空白)2 + 115.96×(△A測定-△A空白)+0.7564
【參考范圍】
健康成人血清:0-6.84μmol/L(0-0.4mg/dL)
(此數(shù)據(jù)僅供參考,建議各實驗室建立自己的參考值范圍)
【檢驗方法的局限性】
- 直接膽紅素(DBIL)測定只是實驗指標(biāo)之一,還要根據(jù)樣本體征以及其它實驗項目、實驗手段進(jìn)行綜合判斷。
- 干擾物:血紅蛋白≤0.2g/L;維生素C≤30mg/dl;甘油三酯≤2000mg/dl時對結(jié)果無干擾。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
試劑空白吸光度:A450nm(10mm)≤0.20。
線性范圍:1.0~410μmol/L(a.線性相關(guān)系數(shù)R2≥0.995。b.1.0-150μmol/L線性偏差≤20.0μmol/L,150~410μmol/L線性偏差≤10.0%)。
準(zhǔn)確度:相對偏差≤10.0%;回收率在100±20%。
精密度:批內(nèi)CV≤4.0%;批間相對極差<5.0%。
靈敏度:樣本濃度為50μmol/L,吸光度差值不小于0.04
【注意事項】
1、本試劑盒僅供科研使用,若不慎將試劑濺到皮膚,眼睛等,必須用清水沖洗,誤食須到醫(yī)院治療。
2、若儀器沒有試劑盒所要求波長,請選擇接近波長。
3、使用時應(yīng)做好防護(hù)措施并遵循所有實驗室試劑操作的注意事項。所有廢棄物應(yīng)按當(dāng)?shù)?法規(guī)要求處理。
4、膽紅素見光易分解,測定時要盡量避光。
直接膽紅素溶于水,與偶氮試劑呈直接反應(yīng),能通過腎隨尿排出體外。肝臟對膽紅素的代謝起著重要作用,包括肝細(xì)胞對血液中間接膽紅素的攝取、結(jié)合和排泄三個過程。血清直接膽紅素的升高,說明經(jīng)肝細(xì)胞處理后膽紅素從膽道的排泄發(fā)生障礙。直接膽紅素的測定有助于黃疸類型的診斷和鑒別診斷。
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