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乙醇酸氧化酶測試盒的檢測原理是什么-信帆生物為您答疑解惑
更新時間:2019-08-21 點擊次數(shù):1589次乙醇酸氧化酶測試盒的檢測原理是什么-信帆生物為您答疑解惑
乙醇酸氧化酶(glycollic oxidase, GO)試劑盒
測定意義
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶,也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶,
它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。
測定原理
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙,在
324nm 有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿。
試劑組成和配制
提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 35mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存,臨用前加 10mL 雙蒸水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃
保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。
酶液提取
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL
提取液),進行冰浴勻漿。12000g, 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
注意事項
1. 測定之前進行預(yù)實驗,若吸光值較高,請將樣品用提取液進行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定,并在
計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。2. 色素含量較高的樣品,可在提取酶時加活性炭吸附。
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