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測(cè)定意義：                          

PPO（EC1.10.3.1）主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。

測(cè)定原理：

PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌，后者在525nm有特征光吸收。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制：

提取液×1瓶，4℃保存；

試劑一×1瓶，4℃保存；

試劑二×1瓶，4℃保存；

試劑三×1瓶，4℃保存；

粗酶液提?。?/span>

1、收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。

2、稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟：

1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至525nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 樣本測(cè)定（在EP管中依次加入下列試劑）

37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃（其它物種）中準(zhǔn)確水浴10min后，迅速放入冰浴中冷卻

充分混勻，5000g，常溫離心10min，收集上清，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，525nm處檢測(cè)測(cè)定管和對(duì)照管吸光度，計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。

信帆生物科技有限公司是一家集生物技術(shù)咨詢、實(shí)驗(yàn)室耗材、科研試劑的銷售、推廣和售后服務(wù)為一體的高科技生物企業(yè)，為各大科研機(jī)構(gòu)、高校、技術(shù)生物企業(yè)提供相關(guān)產(chǎn)品。公司憑借良好的產(chǎn)品質(zhì)量和營銷團(tuán)隊(duì)的奮力開拓，市場(chǎng)空間逐步擴(kuò)大，營銷網(wǎng)絡(luò)覆蓋全國，為客戶供應(yīng)服務(wù)，、用心的服務(wù)贏得了眾多企業(yè)的信賴和好評(píng)，在生物設(shè)備領(lǐng)域迅速崛起。