信帆生物銷售黃嘌呤氧化酶,歡迎訂購!
更新時間:2019-12-02 點擊次數(shù):1003次信帆生物專業(yè)提供黃嘌呤氧化酶,產(chǎn)品質量穩(wěn)定,*,確保銷售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質量標準,適合客戶要求的產(chǎn)品。本產(chǎn)品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.
測定意義:
XOD(EC 1.17.3.2)催化黃嘌呤氧化生成尿酸和超氧陰離子,是活性氧主要來源之一;同時也是核苷酸代謝的關鍵酶之一。XOD主要分布于哺乳動物的心,肺,肝臟等組織中,當肝功能受損時,XOD大量釋放到血清中,對肝損害的診斷具有特異性的意義。
測定原理:
XOD催化黃嘌呤產(chǎn)生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:30mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細菌、細胞或組織樣品的制備
收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每200萬細菌或細胞加入400μL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
操作步驟:
- 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至2940nm,蒸餾水調零。
2、XOD檢測工作液的配制:用時在每瓶試劑二中加入15mL試劑一,充分混勻,待用。
3、測定前將XOD檢測工作液在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。
4、在EP管中加入10μL樣本和250μL工作液,立即混勻并計時,立即取200µL轉移至微量石英比色皿或96孔板中,記錄290nm下初始吸光值A1和1min后的吸光值A2。計算ΔA=A2-A1。
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