人透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測原理!
更新時間:2021-10-26 點擊次數(shù):830次人透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測原理!
透明質(zhì)酸是一種酸性粘多糖,1934年美國哥倫比亞大學(xué)眼科教授Meyer等首先從牛眼玻璃體中分離出該物質(zhì)。透明質(zhì)酸以其*的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機體內(nèi)顯示出多種重要的生理功能,如潤滑關(guān)節(jié),調(diào)節(jié)血管壁的通透性,調(diào)節(jié)蛋白質(zhì),水電解質(zhì)擴散及運轉(zhuǎn),促進創(chuàng)傷愈合等。
產(chǎn)品名稱:人透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T
儲存條件:2-8℃,避光防潮保存
有效期:6個月
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人透明質(zhì)酸(HA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人透明質(zhì)酸(HA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
實驗步驟(僅供參考)
1. 從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!