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γ-谷氨酰半胱氨-酸連接酶(GCL) 活性測試盒 生化試劑
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γ-谷氨酰半胱氨-酸連接酶(GCL) 活性測試盒，在ATP和Mg2*存在下，GCL催化谷氨-酸和半胱氨-酸合成y-谷氨酷半胱氨-酸:同時ATP分解產(chǎn)生無機(jī)磷，通過測定無機(jī)磷增加速率，即可計算出GCL活性。
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γ-谷氨酰半胱氨-酸連接酶(GCL) 活性測試盒
(貨號:A120-1-1 Glutamate Cysteine Ligase 分光光度法 50 T/48 樣)
一、測定原理：
在ATP和Mg2*存在下，GCL催化谷氨-酸和半胱氨-酸合成y-谷氨酷半胱氨-酸:同時ATP分解產(chǎn)生無機(jī)磷，通過測定無機(jī)磷增加速率，即可計算出GCL活性。
二、自備儀器用品:
低溫離心機(jī)、可見分光光度計、水浴鍋、1L玻璃比色皿、濃硫酸、蒸餾水
三、試劑組成和配制:
試劑一:液體x1 瓶，4C保存:
試劑二:粉劑x1 瓶，4保存，臨用前加14mL蒸餾水充分震蕩溶解:
試劑三:粉劑x1 瓶，4保存，臨用前加3.5mL蒸留水充分震蕩溶解:
試劑四:液體x1 瓶，室溫保存:
試劑五: 粉劑x1 瓶，4保存，臨用前加30mL蒸餾水充分震蕩溶解，緩緩加入1.0mL濃硫酸，邊加邊攪拌。
四、樣品前處理:
樣本粗酶液提取詳見說明書。測定組織和細(xì)胞同時需要測定蛋白濃度。可用本所的 A045-2 總蛋白定量測試盒(考馬斯亮法或者 A045-3、A0454 總試盒(BCA )進(jìn)蛋度的測定。
六、GCL測定步驟
1.分光光度計預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長到660nm，用蒸餾水調(diào)零；
2.空白管:
γ-谷氨酰半胱氨-酸連接酶(GCL) 活性測試盒
