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信帆生物提供PCR技術服務，PCR實驗代測

逆轉錄PCR（reverse transcription PCR）或者稱反轉錄PCR（reverse transcription-PCR, RT-PCR），是聚合酶鏈式反應（PCR）的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA，再以此為模板通過PCR進行DNA擴增。

由一條RNA單鏈轉錄為互補DNA（cDNA）稱作“逆轉錄”，由依賴RNA的DNA聚合酶（逆轉錄酶）來完成。

隨后，DNA的另一條鏈通過脫氧核苷酸引物和依賴DNA的DNA聚合酶完成，隨每個循環(huán)倍增，即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶H降解，留下互補DNA。

RT-PCR的指數(shù)擴增是一種很靈敏的技術，可以檢測很低拷貝數(shù)的RNA。RT-PCR廣泛應用于遺傳病的診斷，并且可以用于定量監(jiān)測某種RNA的含量。檢測基因表達的方法，參見Northern Blot法。

RT-PCR的關鍵步驟是在RNA的反轉錄，要求RNA模版為完整的且不含DNA、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。常用的反轉錄酶有兩種，即鳥類成髓細胞性白細胞病毒（avian myeloblastosis virus，AMV）反轉錄酶和莫羅尼鼠類白血病病毒（moloney murine leukemia virus，MMLV）反轉錄酶。

在完成逆轉錄過程之后,通過PCR進行定量分析的時候，隨著技術的發(fā)展，real-time PCR（實時熒光PCR）或ddPCR（數(shù)字PCR）技術也被用來做定量分析，它們比普通PCR進行定量分析時靈敏度更高，定量更精確。

oligo：多聚體，相當于mRNA引物
AMV RT：禽類成髓細胞瘤病毒逆轉錄酶
MMLV RT：莫洛尼鼠白血病病毒逆轉錄酶
dNTPs：脫氧核苷酸
RNase：RNA水解酶
PCR Buffer：RT-PCR緩沖液
MgCl2：2價鎂離子

信帆生物提供PCR技術服務，PCR實驗代測

一、服務介紹

實時PCR（real-time PCR），屬于定量PCR（Q-PCR）的一種，以一定時間內(nèi)DNA的增幅量為基礎進行DNA的定量分析。定量方式包括定量和相對定量。可檢測mRNA，microRNA，lncRNA和DNA水平的基因拷貝數(shù)變化。

二、服務流程

1、引物設計與合成

2、DNA/RNA抽提

3、反轉錄（針對RNA）

4、上機定量分析

三、客戶提供

1、全血、組織或細胞。細胞：細胞數(shù)>10⁷，組織：總量>200mg，DNA或RNA樣品：總量>5ug

2、引物，或由信帆生物提供。

3、基因信息：目的基因名稱、物種和序列（或GenBank Accession Number）。

四、交付內(nèi)容

實驗報告：詳細操作步驟

原始數(shù)據(jù)：溶解曲線圖，擴增曲線圖，ct值

信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清：胎牛血清,人血清,動物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。
生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。
標準品對照品：進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
抗體：一抗,二抗，流式抗體等。
放免試劑盒：進口放免試劑盒，國產(chǎn)放免試劑盒，進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務：放免代測，WB實驗，免疫組化代測，熒光定量PCR代測，病理細胞染色代測，生化實驗代測等。