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腺苷脫氨酶（ADA）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

腺苷脫氨酶（EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA）是嘌呤核苷代謝中重要的酶類，屬于巰基酶，每分子至少含2個(gè)活性巰基，其活性能對(duì)氯汞甲酸*抑制。ADA能催化腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)變?yōu)榇吸S嘌呤核苷，再經(jīng)核苷磷酸化酶作用生成次黃嘌呤，其代謝緩和終產(chǎn)物為尿酸。

測(cè)定原理：腺苷脫氨酶催化腺嘌呤核苷水解，產(chǎn)生次黃嘌呤核苷和氨，然后對(duì)產(chǎn)生的氨進(jìn)行顯色，從而可以計(jì)算血清ADA的活性。
腺苷脫氨酶廣泛分布于各組織中。盲腸、小腸粘膜和脾中含量多，肝中含量?jī)H為小腸的7%-14%，肝臟中90%在細(xì)胞質(zhì)中，細(xì)胞核含量低，但卻是胞核中有關(guān)核酸代謝酶中含量的一個(gè)。在肝臟疾病中，ADA活性增高。阻塞性黃疸時(shí)此酶活性一般不升高，而在肝實(shí)質(zhì)損傷時(shí)，此酶和ALT同時(shí)升高，幫有助于鑒別。在慢性活動(dòng)性肝炎和肝硬化時(shí)ALT陽(yáng)性率較低，而ADA陽(yáng)性率可達(dá)90%左右，增高較明顯。
腺苷脫氨酶ADA催化腺嘌呤核苷水解，產(chǎn)生次黃嘌呤核苷和氨，然后對(duì)產(chǎn)生的氨進(jìn)行顯色，從而可以計(jì)算血清ADA的活性。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約2小時(shí)，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取樣本量?jī)H為20l
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn)： X =102%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物組織、血清等，效果均佳。
所需儀器及自備試劑：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為640nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

操作流程：
1、按步驟加入樣本和R1
2、漩渦混勻，37℃孵育1小時(shí)
3、加入R2、R3，37℃孵育30分鐘后，室溫放置10分鐘
4、640nm波長(zhǎng)，1cm光徑，比色

腺苷脫氨酶（ADA）實(shí)驗(yàn)代測(cè)