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乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）為膽堿能神經(jīng)元的標(biāo)志酶，在神經(jīng)細(xì)胞體內(nèi)合成。
乙酰膽堿是調(diào)節(jié)食道平滑肌運(yùn)動(dòng)的主要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)。食道平滑肌收縮主要是由于乙酰膽堿釋放引起，而乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶和乙酰膽堿脂酶分別是Ach的合成酶和水解酶，調(diào)節(jié)Ach的代謝。食道組織中這兩個(gè)酶的活力代表了食管內(nèi)源性膽堿能神經(jīng)功能狀態(tài)。乙酰膽堿是延髓脊運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元，自主神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)節(jié)前纖維，神經(jīng)節(jié)后膽堿能纖維，以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)許多神經(jīng)元的主要神經(jīng)遞質(zhì)。它是通過(guò)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶的作用，由膽堿與來(lái)處線粒體的乙酰輔酶A所合成。在獲得釋放后，乙酰膽堿刺激特殊的膽堿能受體，這種相互作用很快被局部的膽堿酯酶所終止，后者使乙酰膽堿被除數(shù)水解為膽堿與乙酸鹽。乙酰膽堿的水平由膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶和膽堿的攝取所控制。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約1小時(shí)，可測(cè)50例左右樣本。
2、取樣量微：本法取樣量?jī)H為25l。
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。
5、回收試驗(yàn)： X =102%。
6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
所需儀器及自備試劑：
1、紫外分光光度計(jì)（比色測(cè)定波長(zhǎng)為324nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱（溫度為37℃）以及沸水鍋 （溫度為100℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書。
操作流程：
1、按說(shuō)明書操作將配好的混合液37℃水浴5分鐘后加樣本25ul
2、37°C水浴20分鐘，100°C沸水水浴2分鐘終止反應(yīng)，加雙蒸水
3、混勻,4000 r/min離心10分鐘取上清加R7
4、靜置15分鐘，324nm波長(zhǎng)，2mm光徑，比色

乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）實(shí)驗(yàn)代測(cè)