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改良*品紅染色

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改良*品紅染色
染色體呈深的紫紅色,背景淺的紫紅色或者無色。陰涼通風(fēng)處可保存1年不變質(zhì)。

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改良*品紅染色

實(shí)驗(yàn)步驟:

1、取材:查閱相關(guān)植物對(duì)應(yīng)的根尖分裂旺盛期,在此期間剪取新生根尖約2-3cm,純水稍洗凈。

2、預(yù)處理:用秋水仙素或者8-羥基喹啉預(yù)處理或者置于純水中4℃處理約24h(選做)。

3、固定:取出根尖置于卡諾氏固定液(無水乙醇:冰醋酸=3:1混勻)中4℃固定約1-4h,轉(zhuǎn)移根尖至75%的乙醇中保存;

4、低滲:取出根尖純水稍洗2遍,置于純水中浸泡約30min;

5、解離:取出根尖置于1M HCL溶液中60℃處理10-30min,純水洗2遍,置于純水中浸泡約30min;

6、取材染色:將根尖用純水清洗2遍后置于載玻片上,切取根尖分生區(qū)并撥散,組畫筆畫圈,晾干或者稍烤干分生區(qū)組織細(xì)胞,滴加改良*品紅染液染色15-35min;

7、壓片:直接用染色液封片,稍吸除多余的染色液,蓋玻片上覆蓋濾紙,用橡皮擦或者手指平整地按壓玻片進(jìn)行壓片,分散染色體;

8、封片:將制好的玻片放置-20℃下冰凍約10min,取出后用刀片從蓋玻片一角迅速撬開,晾干或烤干載玻片和蓋玻片,甘油明膠或中性樹膠封片。

9、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

染色結(jié)果:

染色體呈深的紫紅色,背景淺的紫紅色或者無色。

注意事項(xiàng):

1、若固定后的根尖暫時(shí)不使用,保存在75%的乙醇中,下次使用前需要再次固定,4℃條件下約4h。

2、壓片過程中,防止蓋玻片移動(dòng)或者破裂,得到數(shù)量清晰的染色體,此步驟操作較難成功。

3、陰涼通風(fēng)處可保存1年不變質(zhì)。

信帆生物科技有限公司專注于生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,集化學(xué)試劑、生物試劑、銷售于一體的生物公司。為各大高校,科研單位、醫(yī)院、制藥與診斷試劑生物試劑廠家等客戶提供多種生物學(xué)檢測(cè)試劑盒,進(jìn)口常規(guī)生化試劑、抗體、化學(xué)試劑、藥典級(jí)試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、血清等產(chǎn)品。覆蓋分子生物學(xué)、生物化學(xué),細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、蛋白組學(xué)、生物制藥與診斷試劑研發(fā)生物試劑等領(lǐng)域。

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