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兔抗綿羊紅細胞抗體 溶血素

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兔抗綿羊紅細胞抗體 溶血素
貨號:B2880
規(guī)格:1ml*5支
本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!

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兔抗綿羊紅細胞抗體 溶血素

貨號:B2880

規(guī)格:1ml*5支

成分:兔抗綿羊紅細胞溶血素

效價:1:4000

保存:4-8℃(避光保存)

用途:科研、教學(xué)實驗使用,如總補體溶血活性(CH50)檢測、補體結(jié)合實驗(cft)等

產(chǎn)品規(guī)格:1ml/支

注意事項:請穿戴實驗服及一次性手套操作



血清總補體溶血活性(CH50)測定方法

一、原理

利用綿羊細胞與相應(yīng)抗體(溶血素)結(jié)合成的復(fù)合物,可激活血清中的補體,導(dǎo)致紅細胞溶解,當(dāng)紅細胞和溶血素量一定時,在規(guī)定反應(yīng)的時間內(nèi),溶血程度與補體量及活性呈正相關(guān)。在接近50%溶血(CH50)時,二者之間近似直線關(guān)系,故以50%溶血作為最敏感的判斷終點。以引起50%溶血所需的最小補體量為一個CH50U,可計算出待測血清中總的補體溶血活性,以CH50U/ml表示。

 本實驗主要反映補體經(jīng)典活化途徑的溶血功能,其結(jié)果與補體C1~C9各組成分的量及活性均有關(guān)。

二、試劑及配制

1.緩沖-生理鹽水:

(1)貯存液:

     Na2HPO4.12H2O        2.85g

     KH2PO4               0.27g  

     NaCl                17.00g

     蒸餾水定容至100ml,4℃保存?zhèn)溆?/span>

(2)應(yīng)用液:5ml貯存液加95ml蒸餾水,再加10%硫-酸鎂0.1ml,當(dāng)日配制,12小時內(nèi)使用。

2.2%綿羊紅細胞:無菌采取綿羊血液,于等量Alsever液中可保存3周。用前以緩沖液洗3次,并配成2%細胞懸液。必要時可用吸光光度法或細胞計數(shù)法使懸液細胞濃度標                準化。

3.溶血素:將綿羊紅細胞溶血素(效價1:4000),用應(yīng)用液做1:2000倍稀釋(即1ml溶血素加1999ml應(yīng)用液)。

4.待測血清:新鮮血液室溫放置30min,再4℃放置60min,使血-塊收縮,4℃離心(3000r/min)10min,取上清,-20℃保存。

三、操作步驟

試管法(改良Mayer法)

1.致敏羊紅細胞:2%綿羊紅細胞加等量稀釋后的溶血素(1:2000),混勻,置37℃水浴30min。

2.稀釋血清:待測血清0.2ml,加應(yīng)用液3.8ml,稀釋度為1:20。

3.配制溶血標準管:全溶血管:2%綿羊紅細胞2ml加8ml蒸餾水,混勻。50%溶血管:取全溶血管液2ml加緩沖液2ml。

4.按表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置37℃水浴30min



兔抗綿羊紅細胞抗體 溶血素


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